ПЛР діагностика в гінекології: що це таке, суть методу і підготовка

Сучасні способи діагностування без праці виявляють великий спектр збудників інфекцій. Найкращим з усіх способів дослідження вважається метод полімеразної ланцюгової реакції. ПЛР діагностика визначається як експериментальний метод молекулярної біології. За допомогою нього можна сверхточно визначити присутність збудників хвороби при одиничному кількості молекул ДНК і РНК.

Суть методики і показання для проведення

Полімеразна ланцюгова реакція полягає у множині синтезі копій генетичного матеріалу патогенів в лабораторних умовах. Щоб краще розуміти суть методу, варто згадати, що сховищем інформації служить дезоксирибонуклеїнова кислота.

ДНК утворюють 2 нитки, сформовані нуклеотидами. Нуклеотидів існує чотири. Вони мають властивість комплементарності. У почерговому порядку нуклеотидів зашифровані дані, які є унікальними для будь-якого живого організму.

Існує кілька вірусів, у яких інформація про спадковість зашифрована в РНК. РНК, так само як і ДНК володіє унікальністю. Отже, провівши ідентифікацію ДНК, можна визначити, до якого мікроорганізму вона ставитися. Цей процес чимось нагадує ідентифікацію відбитків пальців людини, які є унікальними у кожного.

Отримавши ДНК патогена від пацієнта, відбувається швидка ідентифікація. Виходячи з цього, ПЛР діагностика полягає в обчисленні збудника хвороби їх ДНК або РНК. Цей метод визначає ДНК і РНК не тільки живих, але і нежиттєздатних мікроорганізмів.

Метод ПЛР визначає наявність інфекцій, що мають явно виражені симптоми, і тих, які не дають ніякої клінічної картини.

Аналіз ПЛР виявляє:

  • збудників хламідіозу;
  • мікоплазми;
  • уреаплазми;
  • збудників герпесу;
  • кандидоз;
  • вірус папіломи людини;
  • трихомоніаз;
  • збудника гонореї;
  • цитомегаловірус;
  • сальмонелу;
  • кишкову паличку;
  • стафілококи;
  • мікобактерії;
  • золотистий стафілокок;
  • гемофільної палички;
  • дифтерійну паличку;
  • вірус гепатиту;
  • вірус краснухи;
  • риновіруси;
  • аденовіруси;
  • бактеріального збудника менінгіту.

Список бактерій і вірусів, що виявляються за допомогою ПЛР величезний. Крім наведених вище є ще й безліч інших.

Основними показаннями для проведення аналізу ПЛР вважаються:

  • відмінні від здорових виділення зі статевих органів;
  • неправильний колір і консистенція виділень з сечостатевої системи;
  • відчуття свербіння і печіння в області інтимних місць;
  • неприємний запах з органів сечостатевої системи;
  • дискомфортний сечовипускання;
  • планування вагітності;
  • тривалий кашель;
  • постійне загальне нездужання;
  • затяжна діарея;
  • збільшення периферичних лімфатичних вузлів;
  • температура тіла 37 градусів і вище, яка тримається довгий час.

Переваги дослідження способом ПЛР

Аналіз ПЛР найчастіше застосовують в гінекології. Така методика діагностування дозволяє виявити відразу декількох збудників захворювань, які передаються статевим шляхом, використовуючи тільки один зразок матеріалу. ПЛР допомагає при негативних результатах діагностування іншими способами, точно виявляє результати проведеної антибактеріальної терапії і захворювання на пізніх стадіях розвитку.

Відмінні риси ПЛР перед іншими методами діагностування проявляються в наступному:

  1. Націленість на визначення безпосередньо патогена.
  2. Щоб виявити декількох збудників досить одного біологічного зразка.
  3. Метод визнаний високочутливим і дуже швидким.
  4. Для аналізу використовують різні біологічні матеріали (сечу, кров, слину і т. Д.).
  5. В якості досліджуваного матеріалу можуть виступати архівні зразки і частки біологічних залишків. Дана методика широко використовується, щоб встановити особу і батьківство.
  6. Виявляє збудника ще до прояву клініки захворювання.

Які матеріали використовують і як їх зібрати?

Для лабораторних досліджень методом ПЛР використовують такі матеріали:

  1. Сеча. Є основою при інфікуванні чоловічого сечостатевого тракту і жіночих сечовивідних органів.
  2. Мокрота. Вона служить для діагностування туберкульозу і респіраторних захворювань, причиною яких служать мікоплазми і хламідії.
  3. Біоптати. Застосовуються біоптати шлунка і дванадцятипалої кишки для діагностування хелікобактерної інфекції.
  4. Зіскрібки епітелію зі слизової. Вони потрібні при діагностуванні інфекцій статевих шляхів, наприклад, хламідіозу, гарднереллеза, мікоплазмозу та інших. Ознайомтесь детальніше, від чого буває бактеріальний вагіноз?
  5. Сироватка, кров, плазма. Необхідна при діагностуванні збудників герпесу і т.д. Також на підставі даних зразків проводяться дослідження людини на генетичному рівні.
  6. Біологічна рідина. У цю групу входить плевральна рідина, сік простати, навколоплідні води, рідина з суглобів, слина та інші матеріали.

Для забору матеріалу використовують спеціальну щіточку (зонд), інструменти одноразового користування, щільно закриваються пробірки. Всі пристрої повинні бути стерильними. При проведенні дослідження методом ПЛР потрібно біологічний зразок розміром з голівку звичайної сірники.

Кожен вид досліджуваного матеріалу має свою специфіку забору:

  1. Кров. Забір крові роблять з ліктьової вени обов’язково на голодний шлунок вранці.
  2. Сеча. Найбільш результативно діагностувати даний матеріал, отриманий вранці безпосередньо після пробудження. При терміновому обстеженні збір сечі дозволяється через пару годин після останнього сечовиділення. Для отримання повного і достовірного результату досить 10 мілілітрів рідини.
  3. Зішкріб з уретри. Перед початком процедури забору потрібно провести обробку фізіологічним розчином зовнішнього отвору уретри. У присутності гнійних утворень забір матеріалу здійснюють через 20 хвилин після спустошення сечового міхура. При відсутності природних виділень з уретри, фахівець, використовуючи зонд, здійснює масажні руху.

    При заборі зіскрібка у жіночої статі рекомендується попередньо зробити масаж уретри, а тільки потім вводити зонд. Інструмент вводитися вглиб на 1-1,5 сантиметра у жінок, на 3-4 сантиметри у чоловіків. Далі відбуваються кругові рухи. Для діагностування захворювання у дітей забір матеріалу проводять строго з зовнішньої частини отвору уретри.

  4. Мазок з піхви. Рясні вагінальні виділення і слиз попередньо прибираються ватним тампоном. Далі, використовуючи зонд, береться зішкріб зі слизової поверхні піхви в районі заднього нижнього склепіння або ділянок, схильних до змін через патологію.
  5. Зішкріб з цервікального каналу. Спочатку віддаляється слиз, і обробляється шийка матки стерильним фізіологічним розчином. Глибина введення інструменту повинна становити від 0,5 до 1,5 сантиметрів. Витягуючи зонд важливо не торкатися стінок піхви. При наявності ерозій, зішкріб слід брати на стику здорової і зміненої області.
  6. Секрет передміхурової залози. Спочатку головка статевого члена обробляється фізіологічним розчином. Перед забором матеріалу лікар проводить масаж простати, натискаючи від основи до верхівки. І тільки після цього видавлюється секрет з залози.
  7. Мазок з ротоглотки. Процедура взяття матеріалу відбувається на голодний шлунок, а якщо немає можливості, то через 2-4 години після прийому їжі. Під час забору мазка придавлюється корінь язика шпателем і, обертаючи стерильний зонд, захоплюється матеріал з поверхні мигдалин, піднебінних дужок або задньої стінки глотки. Інструмент витягується, не стикаючись з мовою, слизової оболонки ротової порожнини і поверхнею зубів.
  8. Зішкріб з кон’юнктиви. Рясні гнійні виділення прибираються ватним тампоном, просоченим фізіологічним розчином. Далі береться зішкріб з внутрішньої області нижньої повіки, рухаючись у напрямку до внутрішнього кута ока. Під час процедури повіку дотримується руками, щоб запобігти зіткненню інструменту з віями.

Підготовка до дослідження і результати

Для отримання достовірних і високоточних результатів аналізу, необхідно правильно підготуватися до процедури забору біоматеріалу. А саме:

  1. При заборі зіскрібка з органів сечостатевої системи потрібно забезпечити статевий спокій за дві доби до проведення процедури.
  2. Перед здачею крові заборонено пити і вживати їжу.
  3. Для жіночої статі існують свої правила підготовки до взяття зіскрібка. У менструальний період забір матеріалу не здійснюють. Зішкріб беруть через пару днів після менструації або за кілька днів до її початку.
  4. Чоловікам перед процедурою рекомендується утриматися пару годин від сечовипускання.
  5. Щоб аналіз на гонорею був достовірним, заборонено напередодні спринцюватися і здійснювати гігієну зовнішніх статевих органів. Також заборонено протягом 4 годин до взяття матеріалу ходити в туалет.
  6. Для отримання результату від пройденого лікування, важливо здавати аналізи не раніше ніж через 4 тижні після завершення антибактеріальної терапії.

На тлі запалення слизових оболонок статевих органів забір матеріалу може привести до кровоточивості. Це проявляється наявністю крові в соскобе і подальших незначних кров’яних виділеннях. У чоловіків відбувається фарбування сперми і сечі. Дані ускладнення проходять самостійно без медичного втручання.

Метод ПЛР визнаний найнадійнішим аналізом, що виявляє збудників інфекцій в гінекології. При різних інфекціях точність даного способу складає від 99 до 100%.

Аналіз ПЛР має найвищу чутливістю (до 1000 клітин) одного зразка. Використовуючи даний метод можна виявити навіть поодинокі агенти збудника. У рідкісних випадках результат буває псевдонегативних, і у виняткових випадках – хибнопозитивним.

Помилково негативні результати виходить при некоректному виборі біологічного матеріалу, порушеннях правил збору, зміни генетичної інформації збудників інфекцій. Хибнопозитивний результат може вийти при діагностуванні збудника за загиблими клітинам, які ПЛР сприймає як життєздатні. Це є основним недоліком даного дослідження.

Важливо знати, що позитивний результат лабораторних досліджень не вирок. Негайне звернення до лікаря і правильно проведене лікування сприяє якнайшвидшому лікуванню, а також допомагає запобігти тяжким наслідкам.

Ссылка на основную публикацию